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細胞培養轉染

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細胞爬片

貨號:GC1002

品牌:Servicebio

價格:¥30

規格:

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一、項目簡介

  細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養基內,細胞在玻片上生長,主要用于免疫熒光,免疫組織化學,冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等。

二、實驗流程

  【細胞爬片】步驟

  1、將蓋玻片用洗潔劑清洗干凈,然后用自來水將洗潔劑沖洗干凈,再用純水沖洗三遍,75%的酒精中靜置浸泡10min。

  2、用鑷子夾起蓋玻片在酒精燈上將酒精燒干,溫度不可太高。

  3、將燒干的蓋玻片放在六孔板中,待冷卻后在6孔板中先加入2mL完全培養基,后加入細胞懸液,輕輕上下左右晃動,后置于37℃ 5% CO2 培養箱中培養。

注意事項:避免細胞靠近壁邊緣密度要高些,而處于中央玻片上爬的細胞數量相對較少。比較好的做法是將玻片放入孔板的孔內后,加細胞懸液時只滴到玻片上,一直滴到液體布滿整個玻片又不會溢出玻片邊緣,放在培養箱里,等細胞貼壁后,取出,再滴加培養基布滿整個孔底,繼續培養,這樣玻片上的細胞生長的密度就會很集中。

  【細胞爬片的固定】

  細胞爬片取出后,一般用PBS洗1-2遍,然后再做固定。常用4%多聚甲醛、95%乙醇等固定后,4℃保存。

三、客戶提供信息

  1、細胞英文名稱;

  2、培養條件;

  3、是否貼壁:貼壁細胞制作爬片,懸浮細胞只能做滴片或涂片;

  4、實驗要求。

四、樣本保存運輸

  1、活細胞:一定要不透氣方瓶寄,常溫;

  2、凍存細胞:純干冰件,保證干冰充足。

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